Detection of High-Risk Human Papillomavirus in Cervix Sample in an 11. 3-year Follow-Up after Vaccination against HPV 16/18 / Detecção de papilomavírus humano de alto risco em amostras de colo uterino em 11. 3 anos de acompanhamento após vacinação contra HPV 16/18

Abstract Purpose the aim of this study was to evaluate the pattern of human papillomavirus (HPV) detection in an 11.3-year post-vaccination period in a cohort of adolescent and young women vaccinated or not against HPV 16/18. Methods a subset of 91 women from a single center participating in a randomized clinical trial (2001-2010, NCT00689741/00120848/00518336) with HPV 16/18 AS04- adjuvanted vaccine was evaluated. All women received three doses of the HPV vaccine (n = 48) or a placebo (n = 43), and cervical samples were collected at 6-month intervals. Only in this center, one additional evaluation was performed in 2012. Up to 1,492 cervical samples were tested for HPV-DNA and genotyped with polymerase chain reaction (PCR). The vaccine group characteristics were compared by Chi-square or Fisher exact or Mann-Whitney test. The high-risk (HR)-HPV 6-month-persistent infection rate was calculated. The cumulative infection by HPV group was evaluated by the Kaplan-Meier method and the log-rank test. Results the cumulative infection with any type of HPV in an 11.3-year period was 67% in the HPV vaccine group and 72% in the placebo group (p = 0.408). The longitudinal analysis showed an increase of 4% per year at risk for detection of HR-HPV (non-HPV 16/ 18) over time (p = 0.015), unrelated to vaccination. The cumulative infection with HPV 16/18 was 4% for the HPV vaccine group and 29% for the placebo group (p = 0.003). There were 43 episodes of HR-HPV 6-month persistent infection, unrelated to vaccination. Conclusions this study showed themaintenance of viral detection rate accumulating HR-HPV (non-HPV-16-18) positive tests during a long period post-vaccination, regardless of prior vaccination. This signalizes that the high number of HPV-positive testsmay be maintained after vaccination.

Resumo Objetivos avaliar o padrão de detecção do papilomavírus humano (HPV) em um período de 11.3 anos após a vacinação em uma coorte de adolescentes e mulheres jovens vacinadas ou não contra HPV 16/18. Métodos avaliou-se um subgrupo de 91 mulheres de um único centro, participantes de ensaio clínico randomizado (2001-2010, NCT00689741/00120848/00518336) com a vacina contra HPV 16/18 com adjuvante AS04. Todas as mulheres receberam três doses de vacina contra HPV (n = 48) ou placebo (n = 43), e tiveram amostras cervicais coletadas em intervalos de 6 meses. Somente neste centro, uma avaliação adicional foi realizada em 2012. Um total de 1.492 amostras cervicais foram testadas para DNA-HPV e genotipadas com reação em cadeia da polimerase (RCP). As características dos grupos de vacina contra HPV ou placebo foram comparadas pelo teste de Qui-quadrado ou teste exato de Fisher ou teste de Mann-Whitney. A infecção persistente por 6meses pelo HPV de alto risco (AR) foi calculada. A infecção cumulativa por grupo foi avaliada pelo método de Kaplan-Meier e pelo teste log-rank. Resultados a infecção cumulativa com qualquer tipo de HPV em11.3 anos foi de 67% no grupo vacina contra HPV e de 72% no grupo placebo (p = 0,408). A análise longitudinal mostrou um aumento de 4% ao ano no risco de detecção de HR-HPV (não-HPV 16/18) ao longo do tempo (p = 0,015), não relacionado com a vacinação. A infecção cumulativa com HPV 16/18 foi de 4% para o grupo vacina contra HPV e 29% para o grupo placebo (p = 0,003). Houve 43 episódios de infecção persistente por 6 meses por HR-HPV, não relacionados com a vacinação. Conclusões este estudo mostrou a manutenção da taxa de detecção viral, acumulando testes positivos de HR-HPV (não HPV-16-18) durante longo período pósvacinação, independentemente da vacinação prévia. Isto sinaliza que a alta positividade dos testes de HPV pode ser mantida após a vacinação.

Cervical cancer screening: from Pap smear to future strategies / Triagem de câncer do colo uterino: do teste de Papanicolaou a estratégias futuras

ABSTRACT Previously, the screening for detection of cervical cancer was performed by simple cervicovaginal sample collected by the physician whenever the patient attended the medical consultation, and soon it was established as the annual"Pap smear". Since then, an elementary test has evolved into a complex process with multiple algorithms for the identification of invasive disease. The detection of human papillomavirus (HPV) has become part of the new screening recommendations, resulting in major changes in the guidelines. This review intends to emphasize the most important topics that are part of cervical cancer screening, including cervical cytology and HPV detection, and to discuss particular aspects of cervical cancer in Brazil. Despite the great benefits achieved by the cervical cancer screening programs with cytology and HPV test, there are still important issues to be discussed and improved in defining future strategies, including simplicity and possible application in different socioeconomic contexts, definition of the best test or tests to be applied and recommended interval, minimizing possible harms. After the establishment of screening algorithms well defined by leading organizations, management protocols should be disseminated among physicians and patients by education programs.

RESUMO Inicialmente, a triagem para detecção do câncer de colo uterino era feita por meio de uma simples amostra cervicovaginal colhida pelo médico, sempre que o paciente comparecia à consulta médica; logo se estabeleceu como"exame de Papanicolaou" anual. Desde então, um teste elementar evoluiu para um processo complexo, com múltiplos algoritmos para identificação de doença invasiva. A detecção do papilomavírus humano (HPV) tornou-se parte das novas recomendações de triagem, resultando em grandes mudanças nas diretrizes. Esta revisão pretende enfatizar os tópicos mais importantes que fazem parte do rastreamento do câncer de colo do útero, incluindo citologia cervical e detecção do HPV, bem como discutir aspectos particulares do câncer de colo do útero no Brasil. Apesar dos grandes benefícios alcançados pelos programas de rastreamento do câncer de colo uterino por meio do uso da citologia e do teste de HPV, existem ainda pontos importantes a serem discutidos e melhorados na definição de estratégias futuras, como simplicidade e possível aplicação em diferentes contextos socioeconômicos, definição do melhor teste ou testes a serem aplicados e intervalo recomendável, minimizando possíveis danos. Após o estabelecimento de algoritmos de rastreamento bem definidos pelas principais organizações, protocolos de manejo devem ser divulgados entre médicos e pacientes por programas de educação.

HPV detection in floor of mouth squamous cell carcinoma by PCR amplification / Detecção do HPV em carcinoma espinocelular de assoalho de boca por amplificação da PCR

ABSTRACT Introduction: Studies conducted during the last years, using new technologies for viral detection, permit to consider human papillomavirus (HPV) an etiologic factor for cervical cancer. Besides the relation to genital regions, other anatomic sites have been associated with HPV, including head and neck regions. Objectives: To investigate the prevalence of HPV infection in 35 samples from paraffin-embedded tissues using polymerase chain reaction (PCR)-deoxyribonucleic acid (DNA) amplification, and correlate it with demographic, clinical, and morphological factors and prognosis. Materials and methods: All samples were first amplified with human β-globin gene primers. Samples with positive amplification were subjected to HPV-DNA detection with general GP5 and GP6 primers. Results Only 30 samples were amplified for the β-globin gene. No floor of mouth squamous cell carcinoma cases showed amplification of HPV DNA. Discussion: The absence of HPV-DNA amplification does not suggest that this virus is absent from the process of oral carcinogenesis, since the selected sample is not in the risk group for the development of oral cancer associated with HPV infection. Conclusions: No correlation was found between HPV infection and floor of mouth carcinogenesis, however further studies are necessary.

RESUMO Introdução: Estudos realizados durante os últimos anos permitem considerar a infecção pelopapilomavírus humano (HPV) um fator etiológico para o câncer cervical. Apesar da íntima relação desse vírus com as regiões genitais, outras localizações anatômicas têm sido associadas a tal infecção, inclusive as regiões de cabeça e pescoço. Objetivos: Investigar a prevalência da infecção pelo HPV em 35 amostras parafinadas de carcinoma espinocelular de assoalho de boca, utilizando a amplificação da reação em cadeia dapolimerase (PCR) como método de detecção do ácido desoxirribonucleico (DNA) viral, bem como correlacionar aspectos demográficos, clínicos e morfológicos com o prognóstico da doença. Materiais e métodos: Todas as amostras foram inicialmente amplificadas com o primerpara detecção do gene da β-globina humana. As que tiveram amplificação positiva para o gene da β-globina foram então submetidas à detecção do DNA viral com os primers GP5 e GP6. Resultados: Apenas 30 amostras foram amplificadas para o gene β-globin. Nenhuma das amostras de carcinoma de assoalho de boca demonstrou resultado positivo para amplificação do DNA viral. Discussão: Apesar de a influência do vírus na carcinogênese oral não ter sido comprovada devido à ausência de DNA viral nas amostras, a relação não pode ser descartada, uma vez que as amostras selecionadas não se encontravam em grupo de risco para o desenvolvimento de carcinoma espinocelular de boca associado à infecção pelo HPV. Conclusão: Não foi detectada relação entre a infecção pelo HPV e o carcinoma de assoalho de boca, no entanto mais estudos são necessários sobre o tema.